植物源重组人纤连蛋白在诊断试剂中的应用

植物源重组人纤连蛋白在诊断试剂中的应用

纤连蛋白（Fibronectin，Fn）又称纤维连接蛋白、纤粘蛋白、粘连蛋白，主要由肝脏及血管内皮细胞合成，广泛存在于动物血浆、体液和组织中，是一种大分子糖蛋白，单体分子量为220-250KD，二聚体分子量约为450KD，具有多种生物活性。现代医学研究表明，纤连蛋白含量变化与临床多种疾病密切相关，检测纤连蛋白含量具有非常重要的临床意义。

纤连蛋白的分子结构

   纤连蛋白主要有三种，一种由肝细胞或内皮细胞合成，是以可溶性二聚体状态存在于血浆和体液中，称为血浆纤连蛋白（Plasma fibronectin，PFn）；另一种是由不同类型的细胞合成的，包括成纤维细胞、星状胶质细胞、早期间充质细胞等，以二聚体或多聚体形式沉积于细胞表面、细胞外基质、细胞间隙、基膜和结缔组织中，称为细胞纤连蛋白（Cellular fibronectin，CFn）；前两种类型的 Fn 分子、结构及功能相似，可以相互转化；第三种主要由胚胎组织、胎盘组织、恶性细胞等合成，称为胎儿型纤连蛋白（Fetal fibronectin，FFn），由基因序列 EDA，EDB 过度表达产生。

   目前至少已鉴定了20种纤连蛋白多肽。纤连蛋白不同的亚单位为同一基因的表达产物，只是在转录后RNA的剪接上有所差异，因而产生不同的mRNA。纤连蛋白的每个亚单位由数个结构域构成，具有与细胞表面受体、胶原、纤维蛋白和硫酸蛋白多糖高亲和性的结合部位。

   植物源重组人纤连蛋白（ Recombinant Human Fibronectin, OsrFn），是利用基因重组技术，由水稻胚乳细胞特异性高效表达平台Oryz^HiExp表达并通过蛋白分离纯化技术获得，保留了完整的天然人血浆纤连蛋白PFn功能结构域，其单体分子量约为210KD，SDS-PAGE纯度＞95%，内毒素小于0.5EU/ug。

纤连蛋白的生物学功能

   纤连蛋白的功能非常复杂，目前已知纤连蛋白与细胞之间的粘附、细胞的迁移和趋化有关，因而在对抗炎症、组织修复和创伤愈合方面发挥作用。纤连蛋白有很强的促进单核巨噬细胞吞噬功能的作用，具有非特异性的调理素活性，在抗感染、清除免疫复合物、促使肿瘤基因转化等方面都有重要意义。

   纤连蛋白存在于血小板的α颗粒中，凝血酶和胶原可使血小板释放纤连蛋白，并分泌到血小板表面。在血凝块形成过程中，纤连蛋白促进血小板附着于血管受损部位。在凝血的最后阶段，凝血因子FxⅢa可催化纤连蛋白与纤维蛋白以共价形式牢固结合；纤连蛋白通过凝血因子Ⅻ参与凝血过程。在血管内皮损伤、胶原暴露时，纤连蛋白可以调整纤维蛋白与胶原之间的关系，加速清除纤维蛋白及其降解产物，维护凝血纤溶的动态平衡，具有抗血栓作用。

植物源重组人纤连蛋白OsrFn （）可增强细胞间粘连及细胞与基质的粘连。通过粘着，纤连蛋白可以通过细胞信号转导途径调节细胞的形状和细胞骨架的组织，促进细胞黏连生长增殖、分化，促进细胞铺展、迁移、运动。

纤连蛋白的临床意义

   因为纤连蛋白具有非常复杂的生物学功能，所以其含量变化与临床多种疾病的严重程度和转归密切相关。在以下9种疾病的临床诊断中，检测纤连蛋白含量具有非常重要的临床意义。

1. 纤连蛋白在肝炎、肝硬化中的临床意义

   传染性肝炎患者纤连蛋白值的变化与疾病的病期有关，活动期血清纤连蛋白含量下降，在急性肝炎、重症肝炎，失代偿性肝硬化、肝癌尤其是广泛性肝转移者，血清纤连蛋白含量显著降低，血清纤连蛋白含量回升预示病情好转。

   2.纤连蛋白在冠心病中的临床意义

   冠心病患者血清纤连蛋白含量升高,这种高纤连蛋白状态一方面促进坏死心肌的创伤修复;另一方面促进血小板粘附于血管受损部位，加速清除    纤维蛋白及其降解产物，维护凝血纤溶的动态平衡，具有抗血栓作用。 

   3.纤连蛋白在恶性肿瘤中的临床意义    

   食管癌、胃癌、肝癌、结直肠癌等消化道肿瘤患者血清纤连蛋白水平低于正常对照组,提示消化道肿瘤患者血浆纤连蛋白参与调理作用而降低。而肿瘤性积液纤连蛋白含量又高于其他传染性和非特异性积液，因此对发现早期肿瘤浸润、指导治疗及推测预后具有重要价值。      

   4.纤连蛋白在血液病的临床意义

   急性白血病和败血症患者血浆纤连蛋白PFn显著低于正常值，推测是PFn大量消耗所致。当病情好转时，其含量也逐步回升，痊愈后达到正常水平。

   5.纤连蛋白在糖尿病中的临床意义

   Ⅱ型糖尿病患者的血浆纤连蛋白显著降低，用降糖药治疗后，空腹血糖下降不明显，但血浆纤连蛋白却显著上升，并与空腹血糖值呈负相关，因  此动态监测PFn对观察糖尿病患者的病情有一定的临床价值。

   6.纤连蛋白在原发性高血压、肾病综合征中的临床意义

   Ⅱ型糖尿病患者的血浆纤连蛋白显著降低，用降糖药治疗后，空腹血糖下降不明显，但血浆纤连蛋白却显著上升，并与空腹血糖值呈负相关，因此  动态监测PFn对观察糖尿病患者的病情有一定的临床价值。

   7.纤连蛋白在早产筛查中的临床意义           

   正常妊娠中、晚期羊水和宫颈阴道分泌物中仅含有少量的胎儿FFn。当早产有宫缩时，绒毛膜-蜕膜界面连接断裂，FFn渗入羊水和宫颈中，宫颈阴道分泌物中出现过量FFn ，因此检测FFn含量为防治早产及维护围产期母儿健康提供了监测手段。

   8. 纤连蛋白在妊娠高血压综合征中的临床意义    

   妊高征患者血浆纤连蛋白含量明显高于正常值，且随妊高征病情加重和妊娠周数增加，PFn值亦增高，中、重度妊高征孕妇PFn含量明显高于轻度妊高征组，差异有显著性。因此可用PFn值作为监测妊高征发生和病情严重程度的一个指标。    

   9. 纤连蛋白在类风湿性关节炎中的临床意义     

   类风湿性关节炎患者由于组织损伤后修复的需要，在病变局部或病变周围可能有细胞型CFn生物合成的加快，部分CFn进入血液，从而导致血浆中CFn的继发性升高，因此CFn浓度的变化可能作为疗效观察及预后判断的一个重要指标。